Descripción general de la selección de columnas
Material básico
- La sílice es el material básico más popular. Tiene una alta resistencia física y una superficie que se modifica químicamente con facilidad para hacer que las fases sean aptas para una amplia variedad de modos de HPLC. No obstante, la sílice se disuelve en aguas con un pH ≥6,5, mientras que las sílices enlazadas tienden a ser inestables en un pH ≤2,5. Las nuevas sílices enlazadas pueden tener un intervalo de pH ampliado de 2 - 10 o superior. Las innovaciones más recientes incluyen un intervalo de sílice TYPE-C™ en el que la superficie de esta se modifica con una capa de hidruro de silicio
- Los materiales poliméricos apenas presentan restricciones de pH, pero son menos estables físicamente y menos eficientes que la sílice para separar las moléculas pequeñas. Cuando se trata de moléculas grandes, como las proteínas o los polímeros sintéticos, tienen un rendimiento comparable al de los materiales a base de sílice.
- El carbono grafitado tiene una alta resistencia y una excelente estabilidad de pH, pero no se puede modificar. Puede ser caro y se utiliza mejor en aplicaciones de selectividad única.
- El dióxido de circonio (ZrO2) presenta la ventaja de la selectividad única combinada con una estabilidad química y térmica extrema (hasta 200 °C)
- El óxido de titanio es estable en amplio intervalo de pH y a temperaturas elevadas. A diferencia de la sílice, la superficie del óxido de titanio es alcalina, lo que puede resultar beneficioso en el análisis de fármacos básicos, aunque la eficiencia de separación que presenta es, por lo general, menor
- La alúmina tiene una mayor estabilidad de pH que la sílice, pero no se puede modificar químicamente con facilidad
Modo de separación
En condiciones sencillas, la selección del modo adecuado de separación cromatográfica viene determinada por la polaridad y el tamaño molecular del soluto. A continuación, se recoge una guía de selección general. Para algunas moléculas, pueden ser adecuadas más de una técnica.
